正就读中学的少年迈尔斯（沙梅克·摩尔
正就读中学的少年迈尔斯（沙梅克·摩尔 Shameik Moore 配音）不被一只蒙受喷射性污染的蜘蛛咬伤，随后身材产生神奇的转变。有时机缘，他目睹了蜘蛛侠（克里斯·派恩 Chris Pine 配音）和非法头目金并（列维·施瑞博尔 Liev Schreiber 配音）的战役。为了制止金并利用时空对撞机骚动宇宙，蜘蛛侠最终壮烈捐躯。可未过多久，来自平行宇宙的消极的彼德·帕克（杰克·约翰逊 Jake M. Johnson 配音）展如今迈尔斯眼前。为了制止金并的诡计，并匡助这个帕克返回自身的宇宙，他们闯入金并的老巢。在这一过程中，二人受到章鱼博士和徘徊者的狙击。与此同时，来自其余宇宙的女蜘蛛侠、暗影蜘蛛侠、蜘猪侠、二次元蜘蛛妹接踵展现。
他们合力与恶势力展开斗争……
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